付着細胞の継代について

質問

293T細胞の継代を行っているのですが、血球計算盤で測定された細胞数が3×10の5乗/mlで、
10cmdishに1×10の6乗cellsまきたのですが、細胞数を測定した元の溶解液から上清を吸い取った後、1×10の6乗/mlになるようにＤＭＥＭを加える量を計算する解説を教えてください。希釈などの濃度計算が昔から苦手で・・・
どうしたらもっと理解できるのでしょうか？笑

回答No.1

yanachu

つまり…3×10^5/mlを、1×10^6/mlに濃縮したい、という趣旨でいいでしょうか？

すみません、私は付着細胞を使っての操作をしたことがないので、具体的な作業規模（10mlなのか10Lなのか）やDMEMがいったい何を指しているのかも分かりかねるのですが、単純な計算方法だと以下のようではどうでしょうか。

(1)3×10^5を1/10に濃縮（10mlの混濁液から上澄9mlを取り除く）→3×10^6/1ml

(2)これを3倍希釈（もともとの1ml＋2ml希釈液：DMEM？）→3×10^6／3ml　＝　1×10^6/ml

もっと最終サンプル数がいるのだったら単純に初期量を増やす（10ml→１Lなど)か、
(1)で、1/100に濃縮して、(2)で30倍希釈したらいいと思います。

(1)で、いっきに3/10倍濃縮する→10mlから7mlの上澄を取り除く（→3×10^6/3ml＝1×10^6/ml）
というのはナシかな？（ＤＭＥＭを加える必要がない）

>どうしたら理解できるか

「５％の食塩水１００ｍｌに１０％の食塩水５０ｍｌ入れたら何％の食塩水ができるか？」
と同じような考え方ですね。
「％」（ここでは○×10^5/ml）は忘れて、溶媒（培養液）と溶質（細胞）の質量（容量や個数）を別々で計算すればいいと思います。