直接＆関接蛍光抗体染色法について

質問

タイトルの通りですが、二つの違いについて調べています。

そこで

問）抗体による蛍光染色の際に、抗体を二つ使うのが主流ですが、１つでもよい場合がある理由について
また、その二つのそれぞれの特徴や利点について
教えていただけたらうれしいです。
できればそれについて書かれているサイトなどもあれば・・・・

回答No.1

tir70 · ベストアンサー

>抗体を二つ使う

は，標的抗原に対する１次抗体＋１次抗体に対する２次抗体（蛍光標識）を使う方式ということでしょうか？また，

>１つでもよい場合

は，蛍光標識した１次抗体を使う，という理解でよいでしょうか？

もしも，標的抗原に対する高い特異性とアフィニティを有する蛍光標識１次抗体をお持ちであれば，その１次抗体で直接蛍光染色するに越したことはありません．時間も手順も短くなりますし，おそらく感度もより高くなるでしょう．

ただし，一般的に，任意の標的抗原に対する蛍光標識１次抗体が市販されているとも限りません．そのような蛍光標識１次抗体が手元にない場合，（１次抗体に特異的に結合する）市販の蛍光標識２次抗体を使うことになるでしょう．
　最低限，精製品の１次抗体が入手可能であれば，それを蛍光標識することはそれほど難しくありません．一方，たとえばBSAと混合して出荷された１次抗体や，血清のまま出荷された１次抗体を使う場合，抗体のみを蛍光標識するのは，面倒な仕事です．このような場合は，やはり，蛍光標識２次抗体等を使う方がずっと便利だと思います．

お礼

ありがとうございました。