吸光度について

質問

β-D-ガラクトシダーゼがo-ニトロフェニルβ-D-ガラクトピラノシドを加水分解し、ガラクトースとo-ニトロフェノールを遊離させ、o-ニトロフェノールを定量することにより酵素活性を求める実験をやるのですが、調べてみると、吸光度をはかるときに280nmでやるときと420nmでやる2通りがあったのですが、どう違うのかが分かりません。
280nmはタンパク質に使われるのは知っているのですが、この実験で使うのか？と疑問です。

回答No.1

elpkc

o-ニトロフェノールの吸光スペクトルのピークが
2波長あるのか、o-ニトロフェノールの生成ではなく、
o-ニトロフェニルβ-D-ガラクトピラノシドの減少を測定する波長なのか。
ガラクトースは吸収はなさそうですし。
その辺りです。
各々の物質のピーク波長を調べてみてください。

お礼

ご回答ありがとうございました。