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細胞と培地中の血清の相性ってありますか

以前SW480という細胞をLeibovitz'sL-15(GIBCO),10%FCS(ATCC),1%P/S(SIGMA)で培養していましたが,最近FCSのメーカーをATCCからICN社に変えました.3回めの継代をしたくらいで急に細胞が死んでしまいます.血清のメーカーを変えたせいでしょうか?

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  • MIYD
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回答No.2

ロットチェックをすべての細胞でやるのは現実的には難しいです。 というかやれないと思います。 気難しい(分化する)細胞と一般的な細胞でチェックすることをお勧めします。 前のラボでは正常繊維芽細胞でチェックしていました。 今のラボではSaos2あたりでチェックしているようですが、高い血清を買っているようで、問題が出たことはないようです。 業者に「何でもいいから安いの」というと、本当にだめなロットを持ってくることがあるようですので気をつけたほうがいいと思います。 ただ、SW480に比較的近いと思われる、SW13はそんなにロットを気にしないで飼ったことがあります。 HT29やLovoも論文でよく見かける細胞なので、 どれの細胞が血清の変化に敏感なものなのかはよくわかりません。 >この3種類の細胞は以前使用していた血清に戻したほうがよいのでしょうか. 昔の血清がまだあるのでしたら、それらの細胞専用にして、他の細胞に使わないようにしたほうがいいと思います。 昔の血清と新しいものを半々にしてしばらく飼ってから、 新しい血清だけにする(馴化させる)と、改善するかもしれませんが、 だめなロットだと、それでも飼えないことはあります。

ecoli-ecoli
質問者

お礼

MIYDさん回答ありがとうございました. 早速3つの細胞は元の血清を使用した培地に戻すことにしました. ありがとうございました.

その他の回答 (1)

  • MIYD
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回答No.1

メーカーというよりもロットの違いだと思います。 同じメーカーでもロットが変わると細胞が張り付かなくなったり、分化しなくなったり、誘導しないのに分化したりします。 まずはメーカーに言って、複数のロットのサンプルを貰って、 (50ml位を10本くらいくれると思います) 実験に使う細胞を培養して、 継代や分化できるかを確認してから、 ボトルで買ったほうがいいかと思います。

ecoli-ecoli
質問者

お礼

MIYDさん回答ありがとうございました. Lot checkは行ったものの研究室で培養している全ての細胞をcheckせずに,Lot check後全ての種類の培地に用いています. それが原因でしょうか.

ecoli-ecoli
質問者

補足

MIYDさんアドバイスありがとうございました. 私の研究室で培養しているpopularな細胞でのみLot checkを行いましたが,すべての細胞で行いませんでした. 現在,全ての培地に共通のFCS(ICN社)を用いているのですが, SW480の他にLovo,HT29もこの血清を使用するようになってから 2~3回継代したところで死んでしまうことに気づきました. 他の細胞は元気に育っています. この3種類の細胞は以前使用していた血清に戻したほうがよいのでしょうか.

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