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核酸の除去
酵素により分解した核酸を有機溶剤を用いて分留し除去したいのですが、適当な溶剤を教えてください。
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質問者が選んだベストアンサー
冷たいエタノールを使えば核酸が沈殿するので分離できると思いますが。
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- ice_rif
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回答No.4
細胞抽出液から核酸を吸着除去する樹脂が市販されています。 会社は、ワットマンかフナコシだったと思います。 エタノール沈殿はタンパクも沈殿する可能性があるし、フェ ノール抽出でほとんどのタンパクは変性します。
質問者
お礼
どうもありがとうございました。やはり、クロマトグラフィーを使う方法が、最も適当なのですね。参考になりました。
- poyopoyoyon
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回答No.3
酵素により分解というのは制限酵素による部分的消化ですか。 それともヌクレアーゼのような酵素で処理したのでしょうか。 ばらばらに分解した核酸の回収はできないと思いますが。 制限酵素で切った、ある程度の長さのあるものなら 1の方のおっしゃるようにエタ沈で十分だと思います。 フェノール/クロロホルムを用いてもいいですが廃液処理が面倒ですね。
質問者
お礼
回答ありがとうございました。フェノール/クロロホルムは、エタ沈で上手くいかなかった時の奥の手とします。
- ice_rif
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回答No.2
分解した核酸を分留することはできないと思います。 何をやりたいのか説明してくれれば、回答できると 思います。
質問者
補足
遺伝子組み換えE.coliの細胞内タンパク質を精製したいと考えています。細胞膜は遠心分離機で除去しましたが、核酸をFADの基準値まで除去する方法を考えています。よろしくお願いします。
お礼
ありがとうございます。早速やってみます。エタノールだと廃液処理も楽でいいですね。