酵素液をつくるとき

質問

根端細胞を顕微鏡で見るために、セルラーゼとペクチナーゼをとかして酵素液をつくりたいのですが、酵素を溶解するための溶液がわかりません。論文などで探したのですが、酵素液の組成まではあっても、何で溶かしたかは書いてませんでした。また、用いる酵素によって溶媒も変わるのでしょうか。どなたか教えて下さい。お願いします。

回答No.1

meineko · ベストアンサー

酵素液（反応液）の組成で使っている緩衝液で溶かせばよいと思います。

不安定な酵素などでは、安定性を保つために、保存溶液にはグリセロールなどを入れることがありますが、セルラーゼとかペクチナーゼなら、それほど気にしなくても良いと思います。
＃というより、不安定な酵素なら、溶液状態で売られていることの方が多いですね。
セルラーゼやペクチナーゼは、購入したものですか、購入したものなら、注意書きを書いたデータシートが付いていると思います。確認してみてください。

お礼

ありがとうございます。データシートをさがして確認してみます。

補足

データシートを探したのですが、おそらく先生か誰かがもっているらしく見あたりませんでした。
酵素解離法を示した本に、酵素液としてセルラーゼと、ペクチナーゼそれに加えて塩化カリウムとナトリウムのキレートを加えてるものがあったのですが、それらの無機塩類が緩衝液の役割をするのでしょうか。その場合水でとかしても大丈夫でしょうか。また、ものによってはソルビトールで溶かしたものもあるのすが、なぜ糖類をくわえるのでしょうか。なんか新しい質問みたいですが、こちらに関しても何かご存じでしたら教えて下さい。

回答No.2

Hi104

何に溶かすかは、実験系で変わってくるので、何にしなさいとは言えません。通常は反応液に使用する緩衝液に溶解します。（緩衝液の成分の影響を排除するためですが、高濃度の酵素液を少量加える程度なら、反応系には通常は影響しません）

ただ、ｐHの設定や濃度の関連もあるので、MedLineで根端細胞の論文を探してみてはどうでしょうか？使用している緩衝液と濃度が書かれているはずです。

単に溶かして観るだけなら、極論、水でもいいです（保存はダメ）。これらの酵素はそんなに高価じゃないですし。どうしても今やりたいのでしたら、手元にある適当な最適ｐHあたりの緩衝液に溶かしてしまうのがいいのではないでしょうか？ただし、かしこい実験ではないので、お勧めしません。

参考URL：

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi

お礼

ありがとうございます。論文さがしてみます。