二次元電気泳動のサンプルでSDS-PAGE、Westernをやりたいのですが・・・

質問

二次元電気泳動のサンプルでSDS-PAGE、Western Blottingをやりたいのですが、二次元電気泳動のサンプルには尿素がふくまれているため、煮沸をすると駄目になってしまいます。
何かいい方法はありませんか？

回答No.2

nativepage · ベストアンサー

煮沸しないでもSDS化できますよ。

サンプルバッファーを加えて常温で半日とか、37℃で１時間でいけます。

お礼

御回答ありがとうございます。
煮沸しなくてもSDS化出来るのですね！
とても勉強になりました。
教えていただいた方法で再度やってみようと思います。

回答No.1

MIYD

>二次元電気泳動のサンプルでSDS-PAGE、Western Blottingをやりたい

2Dのスポットを切り出して、
抽出したサンプルをもう一回電気泳動するのですか？
それとも二次元目のゲルからメンブレンにトランスファーしてWBするのですか？
それとも2D用に調整したサンプルを、SDS-PAGEで流したいのですか？

とりあえず、尿素をのぞきたいのでしたら、限外ろ過で除けます。

お礼

ご回答ありがとうございます。
2D用に調製したサンプルをSDS-PAGEでながしたいのです。
回答していただいた通り、限外ろ過を検討してみたいと思います。