P19CL6細胞の心筋への分化について

質問

心筋細胞に関する研究を行うため
P19CL6という細胞を使って、心筋へ分化させ実験を行おうとしています。
理化学研究所からP19Cl6細胞を購入しました。
そして
J. Biol. Chem., Vol. 276, Issue 38, 35978-35989, September 21, 2001
A Novel Myocyte-specific Gene Midori Promotes the Differentiation of P19CL6 Cells into Cardiomyocytes
にあるようにしてDMSOを使って細胞を分化させようとしたのですが、
すでに2回失敗しています。
失敗というのは、どの細胞もまったく心筋細胞のように拍動しません。拍動する細胞を確認したことがないのです。
以前にP19細胞（P19CL6の親細胞です）を使って、別の方法で心筋に分化させたときはうまくいきました。
P19CL6を樹立した方の論文を読むとかなりの高率で細胞が心筋に分化するの述べられているので、どうしたものかと困っています。

同じような状態になった方はいらっしゃいますか？
そして、もしその状態からこうしたら解決したというようなことがあればぜひ教えてください。
よろしくお願いします。

回答No.3

ebikichi

lotチェックは増殖ではなく分化を指標にして行ってください。
P19で分化が良い血清でも、P19CL6ではまったく分化しないなんてことはよくあることです。

P19CL6を樹立した方に直接お聞きになるのがよいでしょう。
恥ずかしがる必要はありません。快く教えてくれますよ。
場合によっては、実際に見せてくれるかもしれません。
きっと論文中の文章には表れない、秘密のレシピがあるはずです。

理研でストックしてるうちに分化能を失ってしまった可能性もあります。P19CL6を樹立した方に細胞を分けてもらうのも手です。

お礼

はい、樹立した方、そして、理研から細胞を買って論文を書かれた方に問合せしてみようと思います。
アドバイスありがとうございました。

回答No.2

ebikichi

途中で投稿してしまいました。m--m

あとコンフレントの程度も重要と思います。いろいろ検討してみてください。

P19CL6はしよう経験がないので、一般論です。

お礼

はい、血清はlotチェックしています。
そして、買い占めています。
コンフルエントな状態で分化させる細胞なようなのですが、
検討してみます。

ありがとうございました。

回答No.1

ebikichi

血清のlotチェックはしましたか？
分化って、増殖以上に血清の影響を受けます。
良いlotを見つけたら、買占めてください。