ELISAについて

質問

初心者からの質問です。
ELISAの最終段階で酵素液を添加した後の酵素反応を
暗所でない場所で行った場合の結果にはどのような影響が
みられるのでしょうか？
吸光度が低下してしまうのでしょうか？

よろしくお願いします。

回答No.1

sugartax

まず、吸光度の高低が何を示しているのか、お分かりでしょうか？

あるサイトでは「サンプル中に含まれる微量の目的物質を、酵素標識した抗体または抗原を用い、抗原抗体反応を利用して定量的に検出する方法」と紹介されています。

「吸光度が低下してしまうのでしょうか？」という質問は「光が反応に影響するか？」と言う質問と等価です。
吸光はあくまで、反応後に目的物を定量化するためのだけのものです。

で、「光が反応に影響するか？」という質問ですが、それは反応次第です。
お使いの酵素や抗原抗体反応がどのようなものか分かりませんし、さらに言うなら「明るい」という非常に漠然とした表現ではいかんとも答え難い。
直射日光がガンガン当たれば、光に影響されにくい反応でも何らかの影響がある可能性も疑うべきです。

むしろ、厳しい言い方をするなら異なる状況で行った実験結果は使い物になりません。
また、熱にしろ光にしろ音にしろ磁気にしろ、高エネルギー下で反応させる場合は、まずその影響を定量化しておくべきです。意図がなければ、そのような状況は排除しなければなりません。