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卵の凍結保存について質問です。
現在マウス卵子を用いた凍結保存 ( vitrification ) を行っています。そこで質問なのですが、耐凍剤で卵を処理する際、卵がへこむように変形するのですがこれは凍結保存の過程で普通に起こるものなのでしょうか?耐凍剤にはエチレングリコールを20 % と 40 % で用いたものを使っています。エチレングリコールのもつ脱水作用によるものだと考えているのですが…。 周りで卵子の凍結保存をやっている人もいなく、手探り状態です。凍結に関する論文を見ても卵子の形状についての記述は見つけられませんでした。 勉強不足で申し訳ありませんが回答をいただけるとうれしいです。
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マウス卵子の凍結についてはあまり詳しくないのですが、20%や40%という事は多分ガラス化凍結ですね。であれば浸透圧によりへこんでもおかしくはないと思いますが、エチレングリコールは組織浸透性が高いのでほどなく浸透圧はつりあって元に戻るのではないかと思います。そこまで観察してたら生存率が低下するので、実は実際に観察した事はないのですが。 ともあれ融解後の卵子の生存率が一般的であれば、特に異常な現象ではないと思います。
お礼
はい、そうです!ガラス化凍結です! おっしゃられているようにEFSにつけてしばらく様子を観察しましたところ数分くらいでもとの卵型にもどりました。 特に異常はないようなので安心しました。回答してくださりありがとうございました!