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継代
非常に初歩的な質問ですみません。 継代について、1:3~1:6など書かれていることが多いですが、 具体的にどのような割合で継代するとよいですか? たとえば、シャーレ1枚から3枚に継代することを、1:3と言えるのでしょうか?
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細胞の継代はされたことがありますでしょうか? 一部当たり前やんと思われることがありましたらご了承ください。 フラスコやシャーレ等でシート状に増殖する細胞であれば継代前にトリプシンで壁面から剥がし、いったん一部の培養液に浮遊させます。 100mLのフラスコで培養した細胞を10mLに浮遊させた場合、新しいフラスコに細胞浮遊液を2mL添加したとします。この場合、全細胞中の5分の1が新しく継代されました。このとき5倍(1:5)で継代した、といいます。
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- juns777
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回答No.3
継代は細胞を広い面積に薄めて培養することですね。 ディッシュの大きさが一緒だとして、 >10cmディッシュで培養して、5mlで回収し浮遊液とし、1mlづつ新しいディッシュにまくことも、5倍と言えますか? どういう形でも、1枚のディッシュから5枚分になったとしたら5倍です。細胞ひとつあたりがが5倍の面積(あるいは体積)を得ることができましたか? 不明な点がありましたら細くお願いします。ご参考になれば幸いです。
- sekainooo
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回答No.1
それは使っている細胞で異なります。浮遊細胞なら、新しいディッシュに培地を加え、そこに継代したいディッシュの3割から6割の細胞を加えればいいだけです。
お礼
早速のご返答ありがとうございました。 10cmディッシュで培養して、5mlで回収し浮遊液とし、1mlづつ新しいディッシュにまくことも、5倍と言えますか? とても初歩的で本当にすみません。