大腸菌での組換え蛋白質の発現
分子量約100kの蛋白質をHis-tagとの融合タンパク質として
大腸菌に作らせていますが、封入体に入ってしまっているようです。
ブロットオーバーレイ（ウエストウエスタン）のプローブとして使いたいと思っています。
機能不明なので、高次構造が大事かどうかも不明ですが、
ちゃんとしてるにこした事はないと思っています。
こうゆう場合、本などを見ると、
低温で培養してみる
GST等とのfusionに変えてみる
ドメインごとに発現させる
等のことが書いてありますが、下２つは結構大変ですよね。
以上のような可溶化条件の検討に努力を費やしたほうが良いのか
それとも、尿素やグアニジン塩酸のようなもので
強引に可溶化して、リフォールディングに努力を費やした方が良いのか
教えてください。
お礼
ありがとうございます！！ お礼遅くなってすいません…。よくご存知でしたね…！そのサイト全然見つけられなかったです！本当にありがとうございました！