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大腸菌の培養温度
大腸菌でタンパクを発現させるのに、いつもは37℃で培養していたのですが、インキュベータの設定を誤って50℃にしてしまっていました。開始から2.5hで気づいてすぐに冷やして37℃に戻したのですが、 大腸菌は死んでいるでしょうか。
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大腸菌は、50℃では死滅しません。 水棲低温菌では厳しいですが、大腸菌なら大丈夫ですね。 でも、タンパクを発現に影響があるかは不明ですね。
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- inquirer_OKwave
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回答No.2
生きてるか死んでるかは OD600でチェックし、増えるか増えないかで確認できると思います。 しかし、順調に育ってたとしてももう一度やり直すことをお勧めします。 そのあとにやる実験にかかる時間や再現性などの ことを考えるとそのサンプルをそのまま続けて実験するのは あまり意味がないと思います。
質問者
お礼
ありがとうございます。 やり直してみます。
- negigi
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回答No.1
どうでしょうね。増えてきたやつをPCRして、確認してみては? 増えてこなかったら、おそらく死んでますけど。
質問者
お礼
ありがとうございます。 増えてきたのでとりあえず生きているということにして次に進んでみます。
お礼
そうなのですね。 タンパクの影響が怖いので、実験は一応中断しました。 ありがとうございました。