- ベストアンサー
ライゲーション前のDNA
ライゲーションをしようと思っているのですが, 制限酵素で切断したベクターをCIP処理、フェノクロ・エタノール沈殿後、-20度で保存したものがあります。 約2週間前になるのですが,このようなベクターをライゲーションに用いることは可能でしょうか? プロトコールには-20℃で保存とあるのですが, どの程度保存できるものなのでしょうか?
- みんなの回答 (3)
- 専門家の回答
質問者が選んだベストアンサー
ベクターを制限酵素で切断し、脱リン酸化した ものが市販されています。-20度で半年とか 1年とかは大丈夫なんじゃないでしょうか。
その他の回答 (2)
noname#17364
回答No.3
ふたたびこんにちは。 すみません、改行の位置の関係で「-(マイナス)」が見えませんでした。20度かと思って、さっきの回答を書いてしまいました。すみません。 -20度であれば問題ないと思います。自分の経験でも半年くらいは余裕で大丈夫です。 混乱させてしまってすみません。
質問者
お礼
nyanzowさん、どうもありがとうございます。 早速、ライゲーションしようと思います。
noname#17364
回答No.1
こんにちは。 何日放置されたのか分かりませんが、使えないでしょう。それを使って失敗したとしても、ベクターがダメだったのか、ライゲーションの手技がダメだったのか、インサートに問題があったのか原因を絞れないからです。 試しにやってみても良いかもしれませんが、結果が信用できない実験は結局やる意味がないと思います。私だったら、めんどくさいけど作り直します。
お礼
ice_rifさん,どうもありがとうございます。