HPLCのスキャンレートについて

質問

HPLCのスキャンレート(Hz)について教えてください。
メーカーによって20Hzのものと80Hzのものがありますが、
メリット、デメリットなどありますでしょうか？
(1分間にとれるデータポイントの数が違うという事を
聞いた事がありますが…)

よろしくお願いいたします。

回答No.5

c80s3xxx · ベストアンサー

まず，HPLC では検出器出力を時間に対して記録する必要があります．むかしのアナログのペンレコの時代はともかく，今のようにコンピュータで記録するようになると真の意味では連続記録はできず，適当な時間間隔ごとにデータを取得することになります．これをどのくらいの頻度で行うかがサンプリングレートです．たとえば1秒に1回でサンプリングしている場合は，ピーク幅が2秒くらいしかないような場合には正確なピーク形状を記録できないのは明らかです．一方，ピーク幅が分オーダになるような場合には，数秒に1回というようなサンプリングレートでも十分だったりもします．

一方，PDA のスキャンレートは意味が違います．
PDA はいくつかの波長での吸光度を同時測定できるというようにふつうは考えていますが，実際にはそうではありません．PDAはその名の通り，光検出器であるフォトダイオードが多数並んでいます．これらの出力を同時に読み出すことは，数チャンネルくらいならともかく，現在の512chとか1024chとかの場合は，現実的ではありません．なぜなら，読み出し回路等もすべてこのチャンネル数用意しなくてはならないからです．実際には，各ダイオードの出力を順番にスイッチで切り替えて，ひとつの回路系統で時分割の形で多チャンネルデータを得ています．この，スイッチで切り替えていってすべてのダイオードの出力を読んでいくというのが「スキャン」というプロセスです．したがって，スキャンの最初と最後では読み出しのタイミングがそれなりにずれていますので，スキャン速度はサンプリングレートより十分に速くないとPDAの意味がありません．また，1回のスキャンのあと，次のスキャンをする間には，なにがしかの処理時間が挟まるのが普通です．
スキャンレートを上げるということは，1回のフォトダイオードの読み取り時間を短くすることになります．これは感度，SN比の点から不利になります．一方，スキャンレートを下げると感度やSN比の点では有利になりますが，必然的にサンプリングレートを下げざるをえないので，高速な事象に追随できなくなります．

補足

なるほど、大変よく分かりました。
ありがとうございました。

すいません、もう一点…
20Hzや80Hzの周波数は、数字が大きければ早いという事は
分かるのですが、どの様な意味の数字なのでしょうか？
(1秒間の走査回数？)

よろしくお願いいたします。

回答No.6

c80s3xxx

Hz の意味合いは，厳密には検出器メーカに聞かないとわかりません．
1秒間に最大でその回数だけのスペクトルセットを吐き出せるということなのでしょうが，必ずそうかどうかはなんとも．
あと，こういう用語はメーカによって独自の定義で使っていることがあるので，私の解釈通りでないメーカがあっても不思議でも何でもありませんので，念のため．

お礼

親切なご回答、誠にありがとうございました。

機会があればメーカーに確認してみようと思います。
ありがとうございました。

回答No.4

noname#160321

電気化学的検出器の話しでしょうか？

補足

PDAでの話でした。
説明が足りず申し訳ございません。

よろしくお願いいたします。

回答No.3

c80s3xxx

#2 の方のいうのは，サンプリングレートですよねえ．．．

補足

ご回答ありがとうございます。

サンプリングレート＝スキャンレートと
考えておりました。
説明が足りず申し訳ありませんでした。

回答No.2

elpkc

UPLCなど、短時間で分析が完了する場合などは、
ピークがすぐに立ち上がり、すぐに低くなるので、
スキャンレートを短くしないと、ピーク形状がジャギー(ギサギサになり)
きれいに山形になりません。
余り細かくすると、データ容量が大きくなるのがデメリットですかね。

補足

ご回答ありがとうございます。

では、スキャンレートが短ければ(20Hzよりも80Hzの方が)
UPLCなど溶出時間が早いものでは良いという事ですよね。

通常UPLCではどの程度のスキャンレートで測定を行う
のでしょうか？

また、ピーク形状がギザギザになるのは、データポイントが
足りないためという事でしょうか？

よろしくお願いいたします。

回答No.1

c80s3xxx

一般的にいって，HPLC ではスキャンレートなる言葉が出てくる場面はないと思うんですが．
特定の検出器についての話ですか?

補足

ご回答ありがとうございます。
PDAでの話です。
また、サンプリングレート＝スキャンレートと
認識しておりました。
実際はサンプリングレートと表記するのでしょうか？
(メーカーカタログにスキャンレートと記載があった
記憶があるので…)

よろしくお願いいたします。