沈殿後のタンパクの溶かし方

質問

藍藻類からタンパク質を抽出し、二次元電気泳動にかけようとしています。
タンパクの抽出後、精製のためアセトン＋TCAで沈殿させているのですが、この沈殿が非常に溶けにくく困っています。どなたかよい方法をご存じであればアドバイスください。
よろしくお願いします。

回答No.2

hidezzz

urea入りのバッファーに溶かすのが良いのでは。二次元は通常このようなバッファーに溶かして泳動します。

お礼

ありがとうございます。しばらくメールが見られずお礼が遅くなってしまった失礼をお許しください。これまではご指摘のとおりurea入りのバッファーに溶かそうとしていたのですが、それが溶けにくいのです。ureaの濃度を上げてみたりしたのですが、、、。どのくらいの濃度で溶解しておられますか？

回答No.1

ADEMU

泳動にかけるのですから過激な溶液にはしたくないですよね。
ＴＣＡ（テトラクロル酢酸？）かＴＦＡ（私はよくこちらを使用します）の１％溶液で（溶解する量の１０分の１）溶かしてから目的のバッファー（９倍量）で溶解する方法はどうでしょうか？
水に難溶の蛋白やペプチドを溶解する時にいつもやっている方法です。