PCRのプライマーの濃度について

質問

PCRについての知識はあまり無く、はじめて、PCRをします。
RAPD法を行ないたいと思い、長さ10merのオリゴマーというものを購入し、これをプライマーとしました。
しかし、内容量　0.5OD、Tm値　32℃としか説明書には　書いてないのですが、
プライマー濃度を1μＭにするには　どうしたらよいのでしょうか？？どのように　計算してよいのか　わからず大変困ってます。どうか、宜しくお願いします。

回答No.1

silas80 · ベストアンサー

PCRはよくやっています。
プライマーの濃度ですが元の濃度がわからないと稀釈はできません。
プライマーが入っているチューブに濃度がかいていませんか？
私が使っているプライマーは１００μMで送られてきて5μMに稀釈してます。
方法は95μlの滅菌水に5μlのプライマー原液をいれてプライマー100μlをつくっています。
ricottinさんの場合は元の濃度がわかりませんが
もし100μlのプライマーを作りたいなら濃度が100μMなら99μlの水に1μMのプライマー原液をいれればいいです。
濃度が違うなら
終濃度（ここでは1μMなので１でいいです）/原液の濃度×作りたいプライマー量でできます。
参考にしてください

お礼

ありがとうございます。しかし、プライマーのチューブも箱も見たのですが　どこにも濃度は書いてないのですが・・・。こういう場合は　どうしたらよいのでしょうか？？

回答No.3

fujishiro

ODって吸光度の単位でしょ？
吸光度で濃度があらわせるのは知ってますよね？
そもそもDNAなら260nmの波長で濃度をはかるから計算できますよ。

ってゆーか液状で送ってきたんですか？フリーズドライではなく？
ま、それならふつーは濃度書いててくれてもよさそうなもんだけど

参考URL：

http://www.invitrogen.co.jp/jp_prdct/pdf/2002-32-MB.pdf

お礼

フリーズドライで送られてきました。しかし、説明という説明はなく、困ってました。製造元に問い合わせてみます。URL参考にさせていただきます。ありがとうございました。

回答No.2

rei00

> プライマーのチューブも箱も見たのですが
> どこにも濃度は書いてないのですが・・・。

　ご質問文に『内容量　0.5OD』と書かれていますが，これに関する説明は書かれていませんか？

　よく分からなければ，製造会社に問合せるのが一番確かです。電話ででも構わないと思います。

お礼

ありがとうございます。内容量についても　説明が書いてないので　問い合わせてみます。