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※ ChatGPTを利用し、要約された質問です(原文:授業で聞いたのですが)

細胞のタンパク質発現方法とは?

このQ&Aのポイント
  • 細胞にタンパク質を過剰発現させる方法の一つに、GATEWAYシステムが用いられています。
  • GATEWAYシステムは、mRNAを抽出してcDNAを合成し、特定の配列を持つプライマーを使用してPCRを行うことで、タンパク質の過剰発現を実現します。
  • 1回のPCRだけでは十分な増幅が得られない場合、2ndPCRを行うことでさらなる増幅を行い、過剰なタンパク質発現を実現します。

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回答No.1

2段階でPCRする意味は一気に複数の標的遺伝子を扱えるということではないでしょうか。 1段階目でそれぞれの遺伝子に短いattB配列を付加させることができれば、2段階目はattBに対するプライマーのみで増幅させることができます。 つまり、2段階目のPCRは様々な遺伝子を同じ条件でPCRできることになるので、別々の遺伝子を一度に扱えるということになり、結果、実験が効率化されます。 ですので、遺伝子を複数個クローニングするわけではないのであれば、普通にaatB配列を含んだプライマーで増幅させてもよいと思います。 http://biotech.nikkeibp.co.jp/netlink/lto/gateway/ http://www.j-tokkyo.com/2003/C12N/JP2003-159063.shtml

noname#184617
質問者

お礼

もう一度わからなかったところを先生に聞きました。 解答ありがとうございました!!