ハイブリドーマ細胞の成育およびクローニングについて

質問

現在、モノクローナル抗体産生ハイブリドーマ細胞の培養と作成をおこなっているのですが、そこで僕たちは以前までハイブリドーマ細胞のクローニング効率の増加や増殖促進作用のあるハイブリドーマクローニングファクターという試薬を使っていました。しかし、この試薬が販売中止になりこれに代わる試薬を探しています。何かよい試薬はありませんか？できれば販売元の企業名と培養培地にどのくらいの濃度で効果があるかを教えてくれれば光栄です。

回答No.1

alanami

私はIL-6を含むbricloneを使用したことがあります。これを最終濃度5～10%添加して使用しました。生育はまずまずだったと思います。

余談ですが、モノクロ作製の経験から言えることは、上記の増殖因子がないと増殖しないようなハイブリドーマはたとえ樹立したとしても扱いが困難なケースが多いです。よって、最初から増殖能の高いハイブリドーマを選択することをオススメします。私はstem cell technologies社のメチルセルロース培地（medium D)を使っています。これは液体培地と違い、コロニー化したハイブリドーマをピックアップできるので、増殖能が良いものを選ぶことができます。更に最初からクローン化しているので、クローニングの必要がありません。

http://www.stemcell.com/search/default.aspx?s=medium%20D

参考URL：

http://www.interlab.com.tw/front/bin/partprint.phtml?Part=b001&Category=0&Style=1

お礼

参考になりました。確かに、成長増加因子等を添加しなくても増殖能が高いハイブリドーマを選択するほうが扱い易いですね。勧められたbricloneの使用も検討してみます。ありがとうございました。