※ ChatGPTを利用し、要約された質問です(原文:全血よりゲノムDNA抽出)
全血よりゲノムDNA抽出の方法とタンパク除去について
このQ&Aのポイント
学生実習で全血からゲノムDNAを抽出するために使用しているKitの試薬組成が分からないという問題について解説します。
本記事では、全血からのゲノムDNA抽出において使用される試薬の組成について企業秘密のため明かされていない場合の対処方法について紹介します。
全血からのゲノムDNA抽出においてキレイにタンパクを除去する方法について、フェノール処理をしない場合でもタンパクを除去し、ゲノムDNAの精製度を高めることができることを述べます。
いつもお世話になっています。
学生実習で全血からゲノムDNAを抽出するのに某社のKitを使っていて、院生なので準備をしているのですが、Kitの各試薬の組成が(当然ですが)企業秘密みたいで分かりません。
でも実習だから組成がわからないわけにはいかないと教授は言っています。
だったらkit使わなきゃいいのにと思いますが、正確じゃなくてもいいから、論文あたって大体のところを調べろと言われました。
でも結局よく分かりませんでした。
どなたか教えて、というか予想していただけませんか?
プロトコルは
全血300ul+900ul RBC lycis Buf(低張液)→遠心
沈殿した顆粒球+300ul Cell lysis Buf(SDS入り)
→ピペッティング→100ul Protein Precipitation sol→遠心
→イソプロパノール・・・
なんですが、このProtein Precipitation solが、成分は「Ammonium acetate」だけなのに、けっこうキレイにタンパクが除去できるんですよね・・・。
フェノール処理とかいっさいしてないのに、260/280が1.7くらいにちゃんとなるんですよね・・・。
濃度どれくらいだと思われます?
お礼
お礼が遅れまして申し訳ありません。 ご教示いただきありがとうございました。