komii の回答履歴

RT-PCRを行っているのですが、きちんと増えないので困っています。 サイクルを振ってPCRを行ったところ、サイクルに応じてバンドが増えていなかったり、まったく増幅していなかったりします。 また、300bp付近（1kbpラダーで500bpよりも下を眼で判断）に、もやもやっとしたバンドが見えます。 もちろん、アニーリング温度の変更などもためしましたが、効果はありませんでした。 ポジコンはきちんと増えるので、操作上のミスやtempleteがおかしいということはないと考えております。 そこで、PCR反応液にSDSやデムソーを添加すればうまくいく場合があるということを聞きました。 が、添加する量などがわかりません。ご存知の方、よろしくおねがいします。 また、そういった情報の載っている文献や教科書等があれば、あわせて教えていただきたいです。 よろしくおねがいします。

FACSにて細胞の各種レセプター等の検出を行っています。先輩の見よう見まねで、今までは何とかなったのですが、先日、死細胞を除くために使っていたPI溶液がなくなりました。 SIGMAから100mgの粉末のPIを買ったのですが、どうやって溶くのかわかりません。 以前の試験管には、RNAase？やらNaCitrate？などと書いてあった気がします（捨ててしまいました）。 標準的なPI溶液の作成方法を教えてください。

仕事上、ヒトの末梢血より血清を採取しているのですが、溶血していたのではないかと心配です。 末梢血を採取したあと、室温で30min放置してから遠心、上清を採取しています。 手順だと、遠心は1回で、さらさらの上清を電動ピペットで吸うというような方法が記述されていたのですが、プルプルした塊や、くもの巣のようなネバネバした想定外の物質が出現し、この物質を避けつつパスツールピペットで上清を取っていたのですが、下の赤い部分を吸ってしまって上清と沈殿の境目がうやむやになり、やむなく２～３回遠心を繰り返しました。これは血清を採取する上で問題ないですか？度重なる遠心で溶血していないでしょうか？みなさん、遠心は一回で血清を採取されているのでしょうか？ あと、正直、手順からは想像できない事態にイラつき、塊をパスツールピペットでツンツンツンツン・・・・してしまいました。溶血ってどの程度で起こるものなのかわかりませんが、これは溶血していませんか？

卒業研究の実験で、ヒト肝ガン由来細胞株HepG2を扱うことになり、最近培養のトレーニングを始めました。 しかし、継代する際にトリプシンで剥がすと、どうしても凝集してしまい、新しいdishに播いても凝集した細胞が目立ちます。今自分がやっている操作は下の通りです。 100mm dishに１×10の5乗 cells/ml　で播き込み、 培養4日目に培地を捨ててPBSで洗浄し、 トリプシン液1mlを加えて3～5分間インキュベートし（このとき1分毎に顕微鏡で観察しています）、 培地を加えて剥がし、ピペッティングして細胞数を計測、 遠心して培地を捨て、新しい培地で希釈して、dishに播いています。 ちなみに培地は低グルコース濃度のDME培地（serum +)です。 実験では、培地に食品成分を添加し、細胞の脂質合成へ与える影響を調べるのですが、凝集したままの細胞を使用すると細胞が十分に食品成分を取り込めないのではないのか、という不安があります。 そのため、細胞をばらばらにするためにしっかりピペッティングしたりしていますが、時間がかかるために培地の色が赤紫に近くなってしまい、細胞に対するダメージがかなり心配です。 細胞が凝集しないように継代する方法はありますか？ それとも、私が凝集させてしまうのは、単に技術的な問題でしょうか？慣れてくればバラバラにできるようになるのでしょうか？ どなたか、経験のある方、教えてください！

ウイルスって神秘的というか、なんとも不思議なものですね。ウイルスについてもっと知りたいと思いました。 自分でいろいろ探してみたのですが、エイズなどの特定の病気に関連して研究を行っている講座や、感染症防御という観点から研究を行っている講座しか見つけられませんでした。私としては、ウイルスそのものについて研究している方を知りたいのですが・・そもそもそんな人はいるのでしょうか？ 京都大学のウイルス研究所のホームページも見てみたのですが、主に医学と連携しているようで、私が知りたいのとは違うような感じがしました。 専門に生物などを学んできたというわけではないので、私が無知なだけなんでしょうが、どうにか助けて欲しいと思って質問させてもらいました。 どうぞ宜しくお願いします。

スクーターを購入して２人乗りメインで利用しようと考えてます。ヴェクスター１５０かフリーウェイを考えてますが、２人乗りは乗り心地としてどうでしょうか？男２人だと厳しいですか？

　学生の様子や、キャンパス内の雰囲気、 教授のレベルや実際のところどれくらい忙しいのか、就職などなど 何でも良いので教えてください。 お願いします。

Z会の速読英熟語という本が、英検１級のスピーチのトピックの準備に効果的ということを耳にしました。 多岐に渡るトピックについて、ある程度の長さの文章が書かれているように想像するのですが、どこで入手することができるのでしょうか？ また、この本をご存知の方がいらしたら、どのような本か、英検１級のスピーチにどのように役立つのか、教えてください。

大学入試で第一志望には自分の実力が足りず、同じ学部の違う学科に第二志望で合格しました。両親には自分への甘さを指摘され、自分でも反省しています。なので、できれば転科をし、自分のためにももう一度頑張りたいと思っているのですが、いったい転科とはどのような時期に試験があるのでしょうか？大学に問い合わせてみたところ英語・生物・小論文・面接があるということはわかったのですが、1年次から受けられるのですか？

扁桃腺炎が三週間治りません。 抗生剤は最初のケフラールはやや効いた感じでしたが、クラリシッドはまったく効かず、現在はセフゾンに替えてもらいました。 現在の症状は熱はなく、喉の腫れ、痛みだけですが、痛くて唾も飲み込めません。扁桃腺は大きいほうですが、三週間も治らないのは初めてです。 本当に扁桃腺炎なのでしょうか？ほかに疑われる病気はないのでしょうか？ 教えてください。

22歳女性です。 3年前に初めて膀胱炎にかかってから、3ヶ月に1回ぐらいのペースで膀胱炎を繰り返しています。 今月は特に酷く、3月3日に罹患して13日まで抗生物質（バナン）を飲み続けたのに、今日また膀胱炎になってしまいました。 いつもは必ず何か思い当たることがあったのですが、今回はまったくありません。一昨日から昨日まで、彼と温泉旅行をしていたのですが、セックス（昨日の朝）の後はきちんとシャワーで局部を石鹸洗浄しました。以前にも、事後にシャワー洗浄しても膀胱炎になったことはあったのですが、それは24時間以上お風呂に入っていないときでした。今回は、22日のうちに温泉でよく身体を洗った後ですし、もちろん彼も事前に手を洗ってくれていました。 強いて言えば、就職活動の書類作成の関係で、昨夜は5時間しか寝ていません。また、午前中もバタバタして、まだ朝から何も食べていません。ですが、このぐらいはいつも普通にやっていることで、このぐらいの疲れが原因で膀胱炎になるとは考えられません。 また、23日は露天風呂には入ったものの、そこには洗い場がなかったので、身体は洗えず終いでした。ですが、一日ぐらいお風呂をさぼるのはよくあることで、そのタイミングでセックスさえしなければ、膀胱炎にはなりませんでした。

少し前に同じものを投稿しましたが、もう少しアドバイスが聞きたくてまた投稿しました。もし良かったら少しだけでもいいので、皆さんのアドバイスをお願いしたいです。 慶應の理工に行きたいと投稿したものですが、またまた悩んでいます。 今はやる気になって勉強を始めたのですが、何をやっていいのかわかりません。英語が苦手なので、やってはいるんですが、まずは文法から完璧にしていったほうがいいのでしょうか？？毎日単語とか覚えて、英文も毎日読んでいったほうがいいでしょうか？それと、そういう大学に通用する長文問題集などあったら教えてもらえませんか？？文法問題集、単語帳は買いました。 あと、数学「クリアー数学演習I、II、A、B」、物理「アクセスI、II」、化学「センサー」を使っているんですが、こういった問題集でも対応できるのでしょうか？？ もし良かったら、他にも勉強方法のアドバイスなどがあったらお願いします。 よろしくお願いします！！

食品製造関係に従事しているものです。　たぶん接触性皮膚炎だと思うのですが、食品製造中に水産物に直接触れた為その部分が荒れ、それを長期間繰り返すことによりその部分から体液が出てしまい、それが治らない状態が続いています。現在手袋を使用してますがこの液体にはどのような菌がいるのでしょうか？どなたか回答よろしくお願いします。

家の家紋ですが文献にも載っておらず、業者に尋ねてもわからないとのことでした。 どのような調べ方がありますか。 よろしくお願いします。

大学の入学式に着ていく服装とはどのようなものがいいのでしょうか？特に指定はないので、私服でもスーツでもいいとは思うのですが、私服の場合、やはり場に見合った服で無ければ行けないと思うのですが、ファッションとか、全くわからないのでどのような服を着ていけばよいのかわかりません。どなたか教えてくれませんでしょうか？