bananastan の回答履歴

作った１枚のアガロースゲルを使うレーン分だけ切り分けPCR産物を泳動したのですが、なにもでませんでした。先に使用したサンプルはマーカーもバンドも確認できました。 同じゲルで同じマーカーを使用したのに、なぜこんな事になったのでしょう？？どなたか教えて頂けないでしょうか？宜しくお願いいたします。

今回、仕事でプラスミドDNAの制限酵素処理を行うことになりました。 私は分子生物学等の知識に乏しく(医療系出身ですので・・・)、いろいろな実験書や参考書を調べてみたのですがどうしてもわかりません。 うまく説明できませんので、あるページから例題をおかりしましたので、掲載させていただきます。 例題)　大腸菌 DNA を pBR322 の EcoRI 部位にクローニングする。次の問題に答えよ。但し，EcoRI 制限酵素１ unit は，λファージ DNA １μg を，0.1M Tris・HCl，ｐＨ7.5，7mM MgCl2，50mM NaCl 中，37℃，１時間で完全に切断する活性として定義される。λファージ DNA は 50 kbp あり、EcoRI 部位は５カ所ある。 大腸菌 DNA を pBR322 の EcoRI 部位にクローニングするのに，10 μg の大腸菌 DNA を EcoRI 処理したい。必要最少量の 10 倍量の EcoRI を加えるとして，何 unitの EcoRI が必要か。反応は，37 ℃, 12 時間行うことにする。 計算方法等をわかりやすく教えていただけると幸いです。 基本的な質問で申し訳ないのですが、よろしくお願いいたします。

パーシャルを上手く成功させるコツとかありますか？ やったことがないので、詳しいプロトコルとか教えて 頂きたく思います。 今やってる内容は、インサートの作製で、インサートを Nheとkpnで切り出すはずが、Nheがインサートの中でも 1 サイトあるので、パーシャルを用いて切り出そうと しているところです。

遺伝子をクローニングする時、染色体ＤＮＡをSau3AIで部分切断し、ベクターのBamHI部位に挿入するのが一般的みたいですが、なぜ完全切断でなく部分切断なのです？そもそも、部分切断と完全切断の違いはなんですか？よろしくお願いします。

この世で、一番長いＤＮＡを持つ生物と、一番短いＤＮＡを持つ生物を教えてください（現在知られている範囲で）。