r_celery の回答履歴

質問させてくださぃ！！ ウエスタンブロットの ブロッキング→１次抗体をつける→２次抗体をつける という流れを詳しく教えてほしいです。 ブロッキングはスキムミルクをT－TBSに溶かしたものをタッパーに入れて揺らしたらいいんでしょうか？？ １次抗体はラップを引いてその上に１次抗体とキャンデットシグナルをたらしメンブレンをつけるので合ってますか？？ ２次抗体はどのようにつけるのでしょうか？？ 間に挟むWASHについても教えてほしいです。 よろしくお願いします！！！

ウエスタンがどうもうまくいきません。 最終的に発色させると、バックグラウンドのみが発色し、タンパク部分が白く浮き出てきてしまいます。タンパク量の問題なのかと考え、0.25、0.5、１、３、５、10、20μgで試してみましたが、タンパク量に関係なく同様の結果になってしまいました。 一次抗体は100倍希釈(濃すぎでしょうか？)、二次抗体は、500倍、1500倍、2500倍希釈で試しましたが、いずれも同様の結果です。 ブロッキングの回数やブロッキング剤の問題でしょうか・・・。 同じような経験のある方、またその問題を解決された方、アドバイスよろしくお願いします。

下記英文の大意をおしえてください。 We have examined the agonist-dependent internalization of FLAG-tagged muscarinic acetylcholine receptor M4 subtype (M4 receptor), which was transiently expressed in HEK293tsA201 cells. We had presumed that the internalization of M4 receptors would be enhanced by coexpression of G protein-coupled receptor kinase 2 (GRK2) as was the case for muscarinic acetylcholine receptor M2 subtype (M2 receptor), because M4 receptors as well as M2 receptors have two Ser/Thr clusters in the third intracellular loop (i3) which was supposed to be phosphorylated by GRK2

ブロッコリーと小松菜とブタのレバーの塩基対と電荷が分かりません。 本とかねっとで調べてもわかりません。 誰か教えてくれませんか。

細胞膜の免疫蛍光染色にコムギ胚芽凝集素と蛍光色素を結合させたものを使うみたいですが、そのときのコムギ胚芽凝集素って何のために結合させているのですか？ ご存知の方、宜しくお願いします。

タイトルの通りです。

こんにちは。 グランドキャニオンに行く予定です。グランドキャニオンは一泊で行くのがおすすめとききますが、日帰りではグランドキャニオンの良さは体感できないでしょうか？私は空が好きなのですが、グランドキャニオンの空（日帰りバスツアーを検討中なので、日中の空）は美しいですか？ 宜しくお願いいたします。

１：おすすめのジャズバーがあれば、教えてください。 　　私が聞きたいのはデキシーランドジャズ（dixieland jazz）ですので、毎日その系統の音楽をやっているお店がいいです。 　　今のところ、以下の３店に行こうと考えています。 　　・Louisiana Music Factory 　　・Preservation Hall Night 　　・Fritzel's Jazz Pub 　　なので、その他の店をぜひ教えてください。 　　また、上記の３店に行ったことがある方は、感想を教えて頂けると嬉しいです。 ２：マルディグラ（Mardi gras）というお祭りがあるそうなのですが、それに合わせて行った方がいいですか？ 　　私の目的はパレード見物ではなくて、あくまでデキシーランドジャズなのですが、マルディグラでも、ジャズのパレードはやっているのでしょうか？ 　　ホテルの値段も倍で、見物人もすごい人だったので、今のところは避けて行こうと思っています。 ３：おすすめのバンドマンはいますでしょうか？ 　　普段ニューオリンズで演奏している方で、素晴らしいバンドマン、又はバンドがあれば、教えてください。 New Orleansは過去に１度行ったことがありますが、飛行機が遅れた為、夜を楽しむことが出来ませんでした。 なので、今回は夜のジャズバーを満喫したいと思っています。 New Orleansに行ったことがある方、ご回答宜しくお願い致します。

３月末から４月にかけてアメリカに女一人旅を考えています。 海外に一人旅は初めてなので少し不安なのですが、良いホテルや日本の旅行会社がれば教えてください。１泊１５０００円以内で考えています。 旅先は シカゴ、ナッシュビル、メンフィスにそれぞれ２，３泊とニューオーリンズに４、５泊の予定です。