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分子生物学の質問です。 私は学生なのですが、RILsについて勉強しようと思い、本を読んでいますが、いったいRILsとは何なのか、何のために作られるのか、どうやって作成するのか、RILsによるRFLP/RAPDマッピングはどうやって行うのか全然パッとしません。 どなたかわかりやすく説明してもらえればうれしいです。 よろしくお願いします。

あるタンパクの発現を試みているのですがまったく発現しません。意見をいただけると幸いです。よろしくお願いします。以下条件です。 使用ベクター：Qiagen pQE30 発現させるタンパクの由来、鎖長：植物由来、約800bp ホスト：E.coli M15[pREP4]およびBL21(DE3)plyS 培養条件：37℃で培養後、OD600=0.6のとき1mM IPTGを添加、その後25℃で一晩培養。 そのほか、SDS-PAGEにて可溶性・不溶性画分どちらも調べましたが、目的タンパクはありませんでした。ベクター＆インサートDNAはBamHIおよびPstIで切断し、ライゲーションしました。シークエンスも確認しましたが問題ありません。 必要なことがあれば追加します。どんな些細なことでもかまいません。どしどし意見をお願いします。

96-well plateのELISAでハイブリドーマ細胞のスクリーニングを行なっていますが、wellの間でコンタミネーションがあるようです。 というのも、 １．ネガティブコントロールがかなり高い値を出すことがある。 ２．プレートの端の方が高い値が出やすい。 からです。 プレートを洗うときは150マイクロリットルの洗浄液を12連ピペットで加え、プレートをさかさまにして洗浄液を落とし、ペーパータオルに叩いて余分な洗浄液を取るのですが、プレートをさかさまにしたときにコンタミしているのではと思っています。 どうしたらコンタミを防げるかご存知のかた、教えてください。 細口のボトルを使う方法、蛇口の水道水を使う方法、バケツに入れた洗浄液で洗う方法などあるようですが、そのようなやり方でうまくいった方も教えてください。 よろしくお願いします。