nayu-nayu の回答履歴
- 手作り石鹸のための苛性ソーダの購入
石鹸を作りたいのですが水酸化ナトリウムを購入する事ができません。 親と一緒に近所の薬局を回って聞いてみましたがどこの薬局も 「警察にテロ対策で売るなって言われた。」や「前は扱っていたんだけど。」と いう感じで購入することができませんでした。オルトケイ酸ナトリウムでも石鹸が 作れるのでオルトケイ酸ナトリウムを販売してくれるか聞いたところ 「警察にどの薬品も販売するなと言われた」と言われました。 本来なら自粛なのでは?と思い聞いてみると。「警察に言われたからにはしょうがない」と言われました。 薬局はあきらめて車で試薬の販売店に行きましたが「警察になるも売るなと言われた」と 言われたのでバカにして塩化ナトリウムはどうかと聞いたら「売れない」と言われました。 危険性については承知しています。どうすれば購入することができるでしょうか。
- PCRのことについて質問なのですが、現在私が行っている細胞から、DNA
PCRのことについて質問なのですが、現在私が行っている細胞から、DNAを抽出しPCRを行うという実験で、うまくいかず行き詰っているので質問させていただきます。 現在以下の条件でPCRを行っているのですが、うまくいきません。 組成 forwardプライマー:1μL(=1pmol/μL) reverseプライマー:1μL(=1pmol/μL) Go Taq 5xBuffer:10μL dNTP:5μL(final濃度で200μM) Go Taq DNA polymerase:1μL 鋳型DNA:1μL MgCl2:3μL 滅菌水:28μL 計50μL 反応 ・反応 96℃:5分 ↓ 25サイクル 96℃:1分 55℃:1分 72℃:1分 ↓ 72℃:5分 ↓ 4℃: 設計ではPCR産物の長さは約100塩基ですが、これを行うと50塩基のPCR産物が検出され、100塩基のものはまったく確認することができませんでした。 また、プライマーの長さは約20塩基です。プライマーのTm設定はアニーリング温度を55℃と設定して、それよりも+5℃のTm値を持つよう設計しました。 同様の質問をyahoo知恵袋でも行いまして、回答してくださった皆様の条件でも行いましたが、いずれも同じ結果となってしまいました。 http://detail.chiebukuro.yahoo.co.jp/qa/question_detail/q1449649784 また、最近sigma社のXNATR REDExtract-N-AmpTM Tissue PCR Kitの組成液にプライマーと細胞抽出液を入れてPCRを行いましたが同じ結果でした。 原因、改良点の指摘がありましたら是非教えていだけますでしょうか?
- PCRのことについて質問なのですが、現在私が行っている細胞から、DNA
PCRのことについて質問なのですが、現在私が行っている細胞から、DNAを抽出しPCRを行うという実験で、うまくいかず行き詰っているので質問させていただきます。 現在以下の条件でPCRを行っているのですが、うまくいきません。 組成 forwardプライマー:1μL(=1pmol/μL) reverseプライマー:1μL(=1pmol/μL) Go Taq 5xBuffer:10μL dNTP:5μL(final濃度で200μM) Go Taq DNA polymerase:1μL 鋳型DNA:1μL MgCl2:3μL 滅菌水:28μL 計50μL 反応 ・反応 96℃:5分 ↓ 25サイクル 96℃:1分 55℃:1分 72℃:1分 ↓ 72℃:5分 ↓ 4℃: 設計ではPCR産物の長さは約100塩基ですが、これを行うと50塩基のPCR産物が検出され、100塩基のものはまったく確認することができませんでした。 また、プライマーの長さは約20塩基です。プライマーのTm設定はアニーリング温度を55℃と設定して、それよりも+5℃のTm値を持つよう設計しました。 同様の質問をyahoo知恵袋でも行いまして、回答してくださった皆様の条件でも行いましたが、いずれも同じ結果となってしまいました。 http://detail.chiebukuro.yahoo.co.jp/qa/question_detail/q1449649784 また、最近sigma社のXNATR REDExtract-N-AmpTM Tissue PCR Kitの組成液にプライマーと細胞抽出液を入れてPCRを行いましたが同じ結果でした。 原因、改良点の指摘がありましたら是非教えていだけますでしょうか?
- 高校生です。
高校生です。 学校の授業の一環で課題研究として、微生物の研究に取り組んでいます。 土壌から単離したある細菌が、Aspergillus属のカビ(おそらくA.niger)に対し抗菌作用を示すことを見つけ、 その菌が何であるかを調べようとしています。 グラム染色をするための薬品は購入したのですが、それ以外に方法が思いつきません。 キットを買うには予算が足りず、できるだけ簡単に安く出来る方法がないものかと思っています。 何かいい方法はないでしょうか。
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- 生物学
- knsf_it_mp
- 回答数3
- DNA鑑定なんですが・・・。
DNA鑑定なんですが・・・。 私には、私生児の息子がいます。任意で認知をしてもらおうと思っているんですが、相手の親がDNA鑑定をしてからだと言っています。 そこでお互い合意のうえでDNA鑑定をしようと思っています。パソコンで調べると弁護士ばかりがでてきたり、郵送での取引はうさんくさそうだし、信頼ができて料金もあまり高くない所はないのでしょうか? 直接病院に行ってしてもらえるところとかはないのでしょうか? 詳しい方教えてください。 ちなみに私はの住まいは兵庫県神戸市なので、兵庫から大阪くらいまでの距離で希望しています。
- rabbitで作られた2種類の一次抗体でで組織切片に対して二重免疫染色
rabbitで作られた2種類の一次抗体でで組織切片に対して二重免疫染色をしたいのですが、どのような方法があるでしょうか?
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- 生物学
- masahito0408
- 回答数1
- 逆転写PCRについてです。
逆転写PCRについてです。 HPRT1というハウスキーピング遺伝子を使って相対比較しようと思っているのですが、その比較方法がイマイチよくわかりません。 違うゲルを使った場合など違う条件で泳動をかけたとしても比較は可能なのでしょうか? 初心者なのでなるべくわかりやすく説明してもらえると幸いです。
- SDS-PAGEの泳動バッファーは滅菌必要?
SDS-PAGEの泳動バッファーは滅菌必要? SDS-PAGE用の10x泳動バッファー(Tris/Glycine)は 滅菌(オートクレーブ or フィルター)必要ですか? よろしくお願いいたします.
- 現在マウスの胚盤胞からtotal RNAの精製→定量実験を行っています
現在マウスの胚盤胞からtotal RNAの精製→定量実験を行っています。 最終的にはマイクロアレイにかける予定です。 (数十個~100個近く集めるので、例えばsingle-cellを増幅するような特別な方法はとりません。) その定量が、今うまくいっておりません。 blastocyst 1個=2 ngだそうなので、30個=60 ngとして精製していますが、 微量専用の電気泳動で定量すると、数ngと出てしまいます。 brain total RNA60ngをcontolとして同様の処理を行うと、そちらは多少のロスがあるものの、 リーズナブルな量が定量できます。胚になるとどうもダメなようです。 リアルタイムPCRしても、やはり狙ったサイクル数より多くなってしまいました。 マウス胚は、IVFした後胚盤胞まで培養し、少量の培養液と共にエッペンチューブに移し、 すぐにTrizol 200ulを足してよくピペッティング→-80℃保存、という形で回収しています。 いつも培地からそのままエッペンに移しているので、 回収時にmineral oilが含まれているとダメかと思い、brainのサンプルをwith oilバージョンで 試したのですが、non-oil バージョンと収率は変わりませんでした。 哺乳類の胚あるいは卵からtotal RNAを精製し、定量したことのある方、 ご存知のことがあれば教えて頂ければと思います。 よろしくお願い致します。
- 現在マウスの胚盤胞からtotal RNAの精製→定量実験を行っています
現在マウスの胚盤胞からtotal RNAの精製→定量実験を行っています。 最終的にはマイクロアレイにかける予定です。 (数十個~100個近く集めるので、例えばsingle-cellを増幅するような特別な方法はとりません。) その定量が、今うまくいっておりません。 blastocyst 1個=2 ngだそうなので、30個=60 ngとして精製していますが、 微量専用の電気泳動で定量すると、数ngと出てしまいます。 brain total RNA60ngをcontolとして同様の処理を行うと、そちらは多少のロスがあるものの、 リーズナブルな量が定量できます。胚になるとどうもダメなようです。 リアルタイムPCRしても、やはり狙ったサイクル数より多くなってしまいました。 マウス胚は、IVFした後胚盤胞まで培養し、少量の培養液と共にエッペンチューブに移し、 すぐにTrizol 200ulを足してよくピペッティング→-80℃保存、という形で回収しています。 いつも培地からそのままエッペンに移しているので、 回収時にmineral oilが含まれているとダメかと思い、brainのサンプルをwith oilバージョンで 試したのですが、non-oil バージョンと収率は変わりませんでした。 哺乳類の胚あるいは卵からtotal RNAを精製し、定量したことのある方、 ご存知のことがあれば教えて頂ければと思います。 よろしくお願い致します。
- 便秘で救急車を呼ぶのは私だけ?
便秘で救急車を呼ぶのは私だけ? 私は、過去に便秘で救急車に運ばれたことがありました。アレは朝、便意を催してトイレで用を足そうとしましたがなかなかでてきないんです。食事中だったら、ごめんなさい。それで出ないから、其処を指でほじくり出してとろうとしましたが、殆ど出てきません。 もう、正直苦しみました。便秘で。もう、痛くて痛くて額には脂汗が出てきて、30分くらい悶え苦しみました。あまりの苦痛に仕事をお休みして救急車を呼びました。ソレくらい辛かったんです(´:ω:`) その後近くの市民病院で浣腸をして貰って、ようやくバナナ一本分のが出ましたがお医者サン言うには「便秘で救急車呼ばないでね」と強く言われましたが、ウンチ が出なくて救急車を呼ぶのは私だけでしょうか?
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- 病気
- miyabi777l
- 回答数10
- "浮遊細胞"の細胞増殖率を、なるべく簡単に測定したいのですが、
"浮遊細胞"の細胞増殖率を、なるべく簡単に測定したいのですが、 どのような方法があるでしょうか?
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- 生物学
- ponponitai
- 回答数2
- 市販の洗浄瓶とはどういったものか?
市販の洗浄瓶とはどういったものか? 金属端子掃除のため濃度99.99%のイソプロパノールを購入しようとWebで調べたのですが、具体的な購入先はわからなかったのですが、 アマゾンで「薬品識別洗浄瓶 500mLイソプロパノール」というのを見つけたので、洗浄瓶と調べると「使用した実験器具を洗浄するもの」としか出てこないので、 ・中身(イソプロパノール等)が入って売っているのか? ・濃度はどのくらいなのか? が検索してもわからなかったので詳細をご存知の方は教えてください。 下記のURLはアマゾンで「薬品識別洗浄瓶 500mLイソプロパノール」です。 http://www.amazon.co.jp/%E6%9D%B1%E4%BA%AC%E7%A1%9D%E5%AD%90%E5%99%A8%E6%A2%B0-%E8%96%AC%E5%93%81%E8%AD%98%E5%88%A5%E6%B4%97%E6%B5%84%E7%93%B6-500mL%E3%82%A4%E3%82%BD%E3%83%97%E3%83%AD%E3%83%91%E3%83%8E%E3%83%BC%E3%83%AB-2425-0504/dp/B003CVRY0I/ref=sr_1_45?ie=UTF8&s=diy&qid=1270119218&sr=1-45
- 市販の洗浄瓶とはどういったものか?
市販の洗浄瓶とはどういったものか? 金属端子掃除のため濃度99.99%のイソプロパノールを購入しようとWebで調べたのですが、具体的な購入先はわからなかったのですが、 アマゾンで「薬品識別洗浄瓶 500mLイソプロパノール」というのを見つけたので、洗浄瓶と調べると「使用した実験器具を洗浄するもの」としか出てこないので、 ・中身(イソプロパノール等)が入って売っているのか? ・濃度はどのくらいなのか? が検索してもわからなかったので詳細をご存知の方は教えてください。 下記のURLはアマゾンで「薬品識別洗浄瓶 500mLイソプロパノール」です。 http://www.amazon.co.jp/%E6%9D%B1%E4%BA%AC%E7%A1%9D%E5%AD%90%E5%99%A8%E6%A2%B0-%E8%96%AC%E5%93%81%E8%AD%98%E5%88%A5%E6%B4%97%E6%B5%84%E7%93%B6-500mL%E3%82%A4%E3%82%BD%E3%83%97%E3%83%AD%E3%83%91%E3%83%8E%E3%83%BC%E3%83%AB-2425-0504/dp/B003CVRY0I/ref=sr_1_45?ie=UTF8&s=diy&qid=1270119218&sr=1-45
- 細胞培養に関して質問です。
細胞培養に関して質問です。 96 well plateを使って細胞の薬剤への感受性を調べていますが、うまくいきません。 具体的には(1)多くの細胞がwellに接着しません(10,000個/wellを植えても数百程度しか接着しない)。 (2)接着した細胞の寿命が短く7日後にはほとんど死んでしまう(なにもしなくても)。 使っている細胞はLnCAPです。 なにかアドバイスがありましたら是非よろしくお願いします。
- 今週、DSソフトの「ドラゴンクエスト? 幻の大地」が発売になりますが、
今週、DSソフトの「ドラゴンクエスト? 幻の大地」が発売になりますが、昨年発売になった「ドラゴンクエスト? 星空の守り人」の時のように評判になりませんし、それほど周りでも話題になりません。 昨年の「ドラクエ? 星空の守り人」に比べて今回の「ドラクエ? 幻の大地」がそれほど評判にならないのはなぜでしょうか?
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- その他(ボードゲーム)
- DONTARON
- 回答数3
- 電気泳動においてゲルにエチブロを加える理由について
電気泳動においてゲルにエチブロを加える理由について 電気泳動においてゲルを作成する際にエチブロを加えているのですが、これを加える理由が よくわかりません。もしわかる方いましたら回答お願いします。
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- 化学
- katoudesu8
- 回答数2
- 静電気について・・・
この時期になると静電気がとても気になります。 車に乗って降りる時にほぼ毎回「バチッ」と来ます。 車のボディに触った時にも来ますが 車庫のブロック塀や門扉、セルフスタンドでカードを挿入した時にも「バチッ」と来ました。 不快な静電気を防ぐ何か良い方法はないでしょうか? よろしくお願いします。